本发明涉及一种从异叶青兰中分离制备乌苏甲酯的方法，该方法包括以下步骤：⑴将异叶青兰切段后用乙醇进行回流提取，得到提取液；该提取液经减压浓缩，即得提取物；⑵所述提取物用乙酸乙酯在常温条件下进行萃取，得到萃取液，该萃取液经减压浓缩，得到乌苏甲酯粗提物；⑶将所述乌苏甲酯粗提物溶解于乙酸乙酯中，然后加入硅胶拌样，溶剂乙酸乙酯挥干后，干法上硅胶柱二次，经减压浓缩后，得到较纯乌苏甲酯；⑷所述较纯乌苏甲酯用乙醇溶解后结晶除杂，经过滤即得乌苏甲酯晶体。本发明工艺简单、操作简便且分离效率和分离纯度高。同时，本发明所得的乌苏甲酯晶体可应用在肿瘤和急性肝损伤疾病治疗中。
