专利详情

专利名称	一种无背景定向克隆PCR产物的载体及制备方法和应用
申请号	CN201210076722.6	专利类型	发明专利
公开（公告）号	CN102628057A	公开（授权）日	2012.08.08
申请（专利权）人	中国科学院武汉病毒研究所	发明（设计）人	胡杨波;冯立鹏;陈士云
主分类号	C12N15/63(2006.01)I	IPC主分类号	C12N15/63(2006.01)I;C12N15/64(2006.01)I
专利有效期	一种无背景定向克隆PCR产物的载体及制备方法和应用至一种无背景定向克隆PCR产物的载体及制备方法和应用	法律状态	实质审查的生效
说明书摘要	本发明公开了一种无背景定向克隆PCR产物载体及制备方法和应用，其特征是在载体筛选标记基因前引入XcmI盒，该XcmI盒的特征在于XcmI酶切后形成突出的dT末端，且序列拼接后将在筛选标记基因前形成一个无活性的核糖体结合位点，载体自连时筛选标记基因不能表达。本发明制备的载体经XcmI酶切后形成突出dT末端可以应用于TA克隆，dT末端也可以通过T4DNA聚合酶补平形成平末端，应用于平末端连接，方法易行，成本低廉，在两种克隆方法中的应用均可以达到无背景、定向克隆的效果。