专利详情

专利名称	突变青霉素G酰化酶、其重组表达质粒及转化的工程菌株
申请号	CN200610118042.0	专利类型	发明专利
公开（公告）号	CN101177688	公开（授权）日	2008.05.14
申请（专利权）人	中国科学院上海生命科学研究院	发明（设计）人	黄鹤;张磐;王金刚;袁中一;杨晟;姜卫红
主分类号	C12N15/55(2006.01)I	IPC主分类号	C12N15/55(2006.01)I;C12N9/86(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I
专利有效期	突变青霉素G酰化酶、其重组表达质粒及转化的工程菌株至突变青霉素G酰化酶、其重组表达质粒及转化的工程菌株	法律状态	授权
说明书摘要	本发明通过基因定点突变的方法获得的青霉素G酰化酶合成性能提高的基因、突变质粒、工程菌，并可在将工程菌发酵纯化后，获得青霉素G酰化酶合成性能提高的突变酶。本发明先用Kpn I和Pst I双酶切pUC18，然后用T4 polymerase补平，自连得到pZ01；用EcoR I酶切pZ01，再和同样用EcoR I酶切的pEES102连接，获得重组质粒pY020；再以pY020为模板质粒，利用TaKaRa MuTanBEST Kit对B.megaterium PGA进行定点突变，从而获得青霉素G酰化酶合成性能提高的突变质粒。将该突变质粒转化枯草杆菌获得需要的工程菌。将该工程菌放大发酵，纯化后可获得合成产物/水解产物的比值及7-ADCA 最大转化率提高的突变酶。