专利详情

专利名称	白细胞介素－15基因修饰的自然杀伤细胞株及其制备方法
申请号	CN03152968.2	专利类型	发明专利
公开（公告）号	CN1493687	公开（授权）日	2004.05.05
申请（专利权）人	中国科学技术大学;山东省医学科学院基础医学研究所	发明（设计）人	田志刚;张建;魏海明;张建华;孙汭
主分类号	C12N5/08	IPC主分类号	C12N5/08;C12N15/79
专利有效期	白细胞介素－15基因修饰的自然杀伤细胞株及其制备方法至白细胞介素－15基因修饰的自然杀伤细胞株及其制备方法	法律状态	实质审查的生效
说明书摘要	本发明公开了一种白细胞介素－15基因修饰的自然杀伤细胞株及其制备方法，该细胞株表型为CD56强阳性， CD16和CD3均为阴性，其形态为分散的、半贴壁生长状态。其制备方法，是将IL－15的cDNA编码区插入pcDNA3真核表达载体，构建分泌型重组真核表达载体pcDNA3/IL－15；利用脂质体转染NK－92细胞；在筛选培养基中加入 Geneticin(G418)进行筛选；有限稀释克隆化细胞，以IL－15的依赖细胞株测定克隆细胞培养上清中IL－15的活性，从中挑选出表达IL－15的阳性细胞克隆；将该克隆在20～100活性单位的IL－15的完全α－MEM培养基中进行扩增，得到具有临床应用价值的工程细胞株。适于临床用于过继免疫治疗肿瘤。